ГОУ ВПО "Ниж ГМА Росздрава"

Проблемная научная лаборатория микробиологии НИИ ПФМ

Отчет по 2 этапу о выполнении работ по изучению бактериостатического действия аппарата инфракрасной терапии "УРО-БИОФОН" в отношении тест-культуры S. aureus

Подготовлен: заведующей проблемной научной лаборатории микробиологии НИИ ПФМ Ермольевой С.А.

1. Цель исследований

2. Задачи исследований

3. Материалы и оборудование

4. Методы исследований

4.1. Приготовление бактериальной суспензии S. aureus

4.2. Режим проведения эксперимента

4.3. Экспозиционные сроки исследований, режим проведения эксперимента

4.4. Посевы на питательные среды, инкубация и работа с посевами

4.5. Контрольные исследования

5. Результаты исследований и их анализ

6. Выводы по результатам исследований

1. Цель исследований

Изучить воздействие аппарата инфракрасной терапии "УРО-БИОФОН" в отношении музейной тест-культуры S. aureus.

2. Задачи исследований

Изучить динамику бактериостатического действия аппарата инфракрасной терапии "УРО-БИОФОН" в отношении тест-культуры S. aureus в течение 3 дней постоянного воздействия при температуре 37 C.

3. Материалы и оборудование:

- Аппарат инфракрасной терапии "УРО-БИОФОН" (предоставлен Заказчиком)

- Забуференный физиологический раствор рН 6,8 для приготовления бактериальной суспензии

- Питательные среды (мясо-пептонный агар, мясо-пептонный бульон, сахарный бульон) для посевов экспозиционных проб.

- Дозаторы "Socorex" переменного объема для отбора проб экспозиционных взвесей.

- Весы лабораторные электронные Adventurer 4 класса точности.

- Весы аналитические типа АДВ-200М 2 класса точности.

- РН-метрмилливольтметр РН-150 М.

- Шкаф сушильно-стерилизационный ШСС-80.

- Стерилизатор паровой ГК-100-3М.

- Стерилизатор паровой ГК-100-3М.

- Аквадистиллятор ДЭ-4-2 дАО.ООО.736ПС.

- Термостат электрический суховоздушный ТС-1/80.

- Микроскоп единой системы биологический рабочий МИКМЕД-2 вар.2 (ЕС БИМАМ Р-13).

- Микроскоп МБС-9.

- Прибор для счета колоний бактерий ПСБ.

- Центрифуга СМ-50 лабораторная медицинская.

- Холодильник "Стинол".

- Одноразовые чашки Петри.

- Пробирки (бактериологические и центрифужные).

- Стандартный эталон мутности ОСО 42 - 28 - 29-86.

- Культура: S. aureus - музейный (контрольный штамм) номер 906, полученный из ГИСК им. Тарасевича

4. Методы исследований

4.1. Приготовление бактериальной суспензии тест-культуры S. aureus.

Взвесь тест-штамма S. aureus готовится по эталону мутности (5 оптических единиц), что соответствует 5х10 8 КОЕ/мл. Бактериальная суспензия тест-культуры S. aureus была помещена в стерильную пластиковую чашку Петри.

4.2. Режим проведения эксперимента

Постоянное воздействие аппарата инфракрасной терапии "УРО-БИОФОН" в отношении бактериальной суспензии тест-культуры S. aureus проводилось в течение 4 дней в термостате при температуре 37 C. Проведено три серии опытов по 4 дня воздействия аппарата на тест-культуру.

4.3. Экспозиционные сроки исследования

Отбор экспозиционных образцов взвеси тест-культуры проводился в следующие сроки 4 дневного воздействия:

1 сутки - два высева с интервалом 4 часа;

2 сутки - два высева с интервалом 4 часа;

3 сутки - два высева с интервалом 4 часа;

4.4. Посевы на питательные среды, их инкубация и работа с посевами.

Опытные экспозиционные бактериальные суспензии засевали на комплекты питательных сред (МПА, МПБ, сахарный бульон) в равном объеме по 0,1 мл. Инкубация посевов проводилась в термостате при 37±0,3 C в течение 18-24 часов. При этом регистрировалось наличие визуального роста микроорганизмов с описанием их ростовых и морфологических характеристик, тщательным подсчетом выросших колоний, микроскопией мазков с окраской по Граму. Дальнейшее изучение биохимических свойств (18 тестов ПБДС, гемолиз, лецитовителлаза), антибиотикорезистентности (17).

4.5. Контрольные исследования

Одновременно с опытными экспозициями бактериальной суспензии аналогично готовили контрольные бактериальные суспензии тест-культуры S. aureus помещали их в термостат при 37 С, не подвергавшиеся воздействию аппарата инфракрасной терапии "УРО-БИОФОН".

Отбор контрольных проб и посевы, изучение морфологии, биохимии и других вышеперечисленных свойств осуществлялись в тех же условиях и в то же время, что и опытных образцов.

5. Результаты исследований и их анализ

Влияние аппарата инфракрасной терапии "УРО-БИОФОН" на массивность роста тест-культуры, жизнеспособность бактерийной популяции S. aureus.

Первая серия опытов была проведена с 18 декабря 2006 г. по 25 декабря 2006 года.

Вторая серия опытов была проведена с 17 января 2007 г. по 22 января 2007 года.

Третья серия опытов была проведена с 22 января 2007 г. по 29 января 2007 года.

В первой серии опытов отмечено снижение количества стафилококка в 10 раз на 2-3 сутки в опыте, ослабление ферментативной активности маннита на 2-3 сутки. В контроле в течение первых, вторых, третьих суток количественная характеристика стафилококка не изменилась. Как в опыте, так и в контроле не зарегистрировано изменений морфологии, культуральных свойств, чувствительности к антибиотикам.

В опыте выявлены изменения:

1. снизилось общее микробное число в 10 раз;

2. произошло ослабление ферментативной активности расщепления маннита, другие характеристики остались без изменений.

Вторая серия опытов. Результаты первых двух суток воздействия аппарата изменений не зафиксировано. На третьи сутки произошло увеличение количества стафилококка в 100 раз.

В третьей серии опытов без изменений оставались результаты через 24 часа. На вторые и третьи сутки отмечено изменение количественной характеристики в 1000 раз. Ферментативная активность начала ослабляться со вторых суток воздействия, реакция плазмокоагуляции стала отрицательной. Другие характеристики оставались без изменений по сравнению с контрольным образцом.

Обобщая результаты 1 и 2 этапов по воздействию аппарата инфракрасной терапии "УРО-БИОФОН" в отношении музейной тест-культуры S. aureus, было составлено графическое изображение количественных изменений стафилококка (от 10 8 до 10 3 КОЕ/мл) в зависимости от длительности воздействия (рисунок 1).

6. Выводы по результатам исследований

6.1 Изучена динамика бактериостатического действия аппарата инфракрасной терапии "УРО-БИОФОН" в отношении тест-культуры S. aureus в течение 4 дней при трех сериях опытов постоянного воздействия при температуре 37 C.

6.2. В ходе исследования был зарегистрирован бактериостатический эффект на вторые и третьи сутки воздействия аппарата инфракрасной терапии "УРО-БИОФОН" в отношении тест-культуры S. aureus, который проявился значительным снижением массивности роста, умеренным снижением ферментативной активности.